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高效液相色谱-串联质谱法测定酒类产品中13种甜

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关键词:

摘要：

甜味剂是一类重要的食品添加剂，能改善食品风味和口感，提高食品品质，尤其是人工甜味剂因成本低、甜度高、大多不参与代谢过程等优点成为蔗糖的代用品广泛应用于现代食品工业[1-3]，但其可能存在的食品安全风险也一直备受争议。因此，甜味剂的安全性和使用限量一直是各国政府和相关机构关注的热点。我国《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中规定了甜味剂的使用范围和限量[4]。随着食品工业的发展，复合甜味剂的使用和新型甜味剂的开发成为发展的潮流和趋势，但这也对监管提出了新的挑战。2008年11月，美国食品药品管理局（FDA）批准瑞鲍迪苷A可以作为甜味剂应用到美国的食品和饮料中[5]。2014年5月，美国FDA批准高倍甜味剂爱德万甜作为非营养甜味剂和增味剂用于除肉类及家禽之外的食品中[6]。随后，欧盟和我国也相继批准使用食品添加剂新品种爱德万甜。考虑到人工甜味剂的使用所带来的安全隐患，近年来“植物甜味剂”的产量和使用量持续增长。目前，国际市场上产业化和销路最好的天然植物甜味剂为甘草甜素、甜菊糖（甜叶菊甙）和罗汉果甙[7]，并应用于食品工业，但鲜有此类甜味剂相关检测方法的报道。酒类作为一个重要的日常消费品，其质量安全决定了消费安全。近年来，我国酿酒行业发展势头良好，生产技术水平和产品质量不断提升，但也存在较多问题。由于经济利益驱使，一些不法商贩为掩盖酒体苦、涩等不良口感，改善风味，出现在酒中违法添加非自生发酵产物的现象。根据国家食品安全监督抽检结果，酒类产品中违法或过量添加甜味剂是其中一个突出问题，已成为监管重点，但仍有一些企业通过变换种类等方式逃避监管，将未纳入监管范围的一些新型甜味剂（包括植物甜味剂）作为替代品，谋取不正当利益。因此，建立快速、准确测定酒类产品中包含人工新型甜味剂和天然甜味剂在内的复合甜味剂的方法显得非常必要。

近年来，国内外关于酒类产品中甜味剂的研究很多[8-10]，我国也建立了关于甜蜜素、糖精钠、阿斯巴甜等传统甜味剂检测的国家标准[11-13]，但这些研究与标准多针对一种或几种甜味剂，且大多为液相色谱法[14-16]，抗干扰能力较弱，易产生假阳性的情况，即使近几年发布的行业标准[17]和相关文献[1，18-19]，检测种类也并不广泛，对于批准使用的甜味剂新品种，鲜有文献报道，仅可查到的几篇也没有针对酒类产品的检测[6，20]，更没有相关的检测方法标准、产品使用限量指标等。本研究利用高效液相色谱-串联质谱技术建立了酒类产品中13种人工及天然甜味剂的检测方法，覆盖了目前市场上商品化使用的人工甜味剂种类。本方法简便、快速、灵敏，为酒类产品的生产和流通领域中甜味剂的监测提供了技术手段。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

酒样：白酒、葡萄酒、黄酒样品，购自零售超市和商店。

仪器设备：LCMS-8050高效液相色谱-串联质谱仪（日本Shimadzu公司，具体配置为LC-20ADXR×2输液泵，SIL-20AXR自动进样器，DGU-20A3R在线脱气机，CTO-20AC柱温箱，CBM-20A系统控制器，LCMS-8050三重四极杆质谱仪，LabSolutions Ver.5.91色谱工作站）；超声波清洗器（KQ-500DE，昆山超声仪器有限公司）；Milli-Q Reference超纯水器（美国Millipore公司）；Acquity UPLC HSS T3柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm，美国Waters公司）；0.22 μm尼龙滤膜（上海安谱科学仪器有限公司）。

试剂：乙腈、甲醇、乙酸、乙酸铵（HPLC级，Dikma公司）；甜蜜素（Sodium cycamate）、糖精钠（Saccharin sodium）、安赛蜜（Acesulfame-K）、阿斯巴甜（Aspartame）、三氯蔗糖（Sucralose）、甜菊糖苷（Stevioside）、纽甜（Neotame）、阿力甜（Alitame）、甘草酸（Glycyrrhizic acid）、爱德万甜（Advantame）、瑞鲍迪苷A（Rebaudioside A）、罗汉果苷V（Mogroside V）、18β-甘草酸（18β-Glycyrrhetinic acid），美国Sigma-Aldrich公司，加拿大TRC公司和德国 GmbH公司，纯度≥95%。

1.2 标准溶液的配制

分别准确称取13种人工及天然甜味剂标准品于10 mL棕色容量瓶中，用水或甲醇溶解并定容，配制成质量浓度为1 mg/mL的单标储备液，于-18 ℃避光保存。用甲醇稀释并配制中间浓度的标准工作液，于4 ℃避光保存。根据需要用流动相逐级稀释，配制成适当浓度的混合标准工作液，现配现用。

1.3 样品前处理方法

取葡萄酒、黄酒样品2.0 mL于10 mL容量瓶中，用超纯水定容，超声混匀，过0.22 μm滤膜，滤液供测定。

文章来源：《天然气工业》网址: http://www.trqgyzzs.cn/qikandaodu/2020/1209/627.html